大家就知道CMCC與ATCC菌種是什么嗎?對CMCC與ATCC菌種有什么了解嗎?CMCC與ATCC分別是中國醫學微生物菌種保藏管理中心和美國典型菌種保藏中心的縮寫,那么這兩個同為菌種它們有什么區別嗎?下面我們就一起來看看它們的不同之處以及復溶的方法.
實驗原理小鼠骨髓細胞有高度的分裂活性,并且數量非常多,因此不必進行體外培養,可直接觀察到分裂期細胞.
處于分裂期的細胞經秋水仙素處理,阻斷紡錘絲的形成,使細胞分裂停止于中期,此時染色體達到大收縮,具有典型的形態.低滲處理使細胞破裂,便于染色體分散.
ATCC和CMCC的菌種的區別跟聯系?
CMCC是中國醫學微生物菌種保藏管理中心的縮寫,ATCC是美國典型菌種保藏中心的縮寫.
由于菌種保藏單位不同,他們所收藏的菌株也會不同,所以兩種菌是無法用同一名稱統一起來的.做分子生物和微生物實驗有時可以不考慮兩者的區別,只要該菌能滿足實驗需要,但做檢驗就必須按什么標準就用什么菌株.
ATCC菌種用什么復溶
用培養基可能會造成不必要的干擾,有什么緩沖液可以代替或是用生理鹽水嗎?購買的ATCC標準株一般都是細菌的液體培養物經低溫真空凍干,可在培養物中加入幾滴該菌的液體培養基,混均后接種到固體平板或液體培養基中.
菌種到底是個什么東西呀?相信大家應該都沒有聽說過,或許極少數人會知道,那么菌種是如何培養出來的想必大家都不是很清楚,它的培養條件又是怎樣的呢?為了幫助大家能更好的了解菌種,下面就為大家講講菌種的培養條件.
1.培養條件和菌齡實踐證明,采用適培養基和適保藏溫度進行保藏,可提高微生物的存活率,延長菌種保藏期.研究表明,處于穩定期的細胞或成熟的孢子對不良環境具有較強的抗性,因而,保藏非芽胞細菌和酵母菌,應采用對數末期或穩定初期的細胞.而保藏芽胞細菌、放線菌和霉菌,要用成熟的孢子.
2.菌種懸液的濃度為了保證菌種保藏期間具有一定的存活細胞,往往將保藏微生物的細胞濃度增大.一般要求細菌細胞和放線菌孢子的濃度?108/ml,酵母菌細胞和霉菌孢子的濃度>107/ml.液氮超低溫冷凍、真空干燥和真空冷凍干燥過程中,高濃度細胞可降低每個細胞暴露在介質中的面積,從而增強了抗冷凍和抗干燥的能力,提高了細胞的存活率.
3.保護劑采用液氮超低溫冷凍、真空干燥和真空冷凍干燥保藏菌種,保護劑的選擇是提高微生物冷凍或干燥存活率,延長菌種保藏期的關鍵因素.保護劑分為低分子保護劑(低聚糖類、醇類、緩沖鹽類、氨基酸和維生素類)和大分子保護劑(蛋白質和多肽類、多糖類).不同微生物菌種所適宜的保護劑不同,必須通過試驗篩選而確定.
4.凍結速度在液氮法和凍干法保藏菌種的過程中,凍結速度是影響微生物存活率的重要因素.研究表明,真核微生物菌種適宜慢速凍結,而原核微生物菌種經慢速凍結和快速凍結后,細胞存活率差異不顯著.我國菌種保藏一般采用三種方法:斜面低溫保藏法、液體石蠟保藏法、冷凍干燥保藏法.對放線菌還另有沙土管保藏法,對絲狀真菌另加麩皮保藏法.的美國典型菌種保藏中心(ATCC),采取兩種有效的保藏方法,即保藏期一般達5--15年的冷凍干燥保藏法和保藏期一般達20年以上的液氮保藏法,以達到大限度減少傳代次數,避免菌種退化.當菌種保藏機構收到合適菌種時,先將原種制成若干液氮保藏管作為保藏菌種,然后再制成一批冷凍干燥管作為分發用.經5年后,若代(原種)的冷凍干燥保藏菌種已分發完畢,就再打開一瓶液氮保藏原種制成一批冷凍干燥管作為分發用.這樣,至少在20年內,凡獲得該菌種的用戶,至少只是原種的第二代,可以保證所保藏的分發菌種的原有性狀.
5.保藏條件根據菌種保藏的目的和原理,盡量采取低溫、干燥、避光和真空密封等綜合技術措施和條件保藏菌種,以利于菌種保藏期的延長.
6.恢復培養處于液氮冷凍狀態的菌種恢復培養時,通常采用38℃--40℃快速升溫解凍,因為慢速升溫解凍有可能出現胞內再結冰,造成胞內冰晶增大而傷害細胞.
